在 PBS 中制作 4% 甲醛溶液(材料、步骤)

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在 PBS 中制作 4% 甲醛溶液(材料、步骤)
​绝大多数 IHC/ICC 程序使用基于甲醛的固定剂固定组织和细胞。 下面的协议描述了在 PBS 中生成 4% 甲醛溶液的技术。
注意:甲醛是有毒的。 在使用之前,请仔细阅读 MSDS。 应戴手套和安全眼镜,并在通风橱内配制溶液。
所需试剂
去离子水
盐酸(稀释)
氢氧化钠 (1 N)
多聚甲醛粉
1X PBS:0.145 M NaCl、0.0027 M KCl、0.0081 M Na2HPO4、0.0015 M KH2PO4,pH 7.4
材料
过滤器单元
玻璃器皿和搅拌棒(甲醛溶液专用)
手套和眼睛保护
带磁力搅拌器的热板
温度计
通风罩
步骤
对于 1 L 的 4% 甲醛,将 800 mL 的 1X PBS 添加到通风罩中搅拌板上的玻璃烧杯中。 边搅拌边加热至约 60 °C。 注意溶液不要沸腾。
在加热的 PBS 溶液中加入 40 克多聚甲醛粉末。
粉末不会立即溶解到溶液中。 通过从移液器中逐滴添加 1 N NaOH 来缓慢提高 pH 值,直到溶液变清。
一旦多聚甲醛溶解,应将溶液冷却并过滤。
使用 1X PBS 将溶液的体积调整到 1 L。
重新检查 pH 值,并用少量稀 HCl 将其调整到大约 6.9。
该溶液可分装并冷冻或在 2-8 °C 下保存长达一个月。


参考资料
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